抗原通常是由多個抗原決定簇組成的,由一種抗原決定簇刺激機體,由一個B淋巴細胞接受該抗原刺激所產(chǎn)生的抗體稱之為單克隆抗體(MonoclonalAntibody)。由多種抗原決定簇刺激機體,相應地就產(chǎn)生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體,機體內(nèi)所產(chǎn)生的抗體就是多克隆抗體;除了抗原決定簇的多樣性以外,同樣一種抗原決定簇,也可刺激機體產(chǎn)生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五類抗體??乖碳C體,產(chǎn)生免疫學反應,由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體??贵w也可以通過血液透析、免疫球蛋白輸注等方式進行passively transfer。深圳PRR11抗體報價
多克隆抗體免疫動物:免疫用的動物建議選擇適齡的健康雄性動物,雌性動物特別是妊娠動物用于制備免疫抗體則非常不合適,有時甚至不產(chǎn)生抗體。由于對免疫應答的個別差異,免疫時應同時選用數(shù)只動物進行免疫。 抗原是多種多樣的,而且千差萬別。就其化學成分而言,有蛋白質(zhì)抗原、類脂抗原、多糖類抗原和核酸抗原等。就抗原性而言,有完全抗原和不完全抗原。為了獲得較好的抗血清,建議是選用蛋白質(zhì)抗原,如要制備用于篩選細菌表達的 cDNA 文庫或免疫印跡的抗血清,建議選用可降解的蛋白質(zhì)抗原。不同的抗原,其免疫原性的強弱均不相同,這種免疫原性的強弱取決于抗原的分子量、化學活性基團、立體結(jié)構(gòu)、物理形狀和彌散速度等。合肥Prestige Antibodies抗體補給公司抗體是免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的一種蛋白質(zhì),能夠識別并中和入侵機體的病原體。
多克隆抗體免疫動物:供免疫用的動物主要是哺乳動物和禽類,常選擇家兔、綿羊、山羊、馬、騾和豚鼠及小鼠等。動物的選擇常根據(jù)抗體的用途和量來決定,也與抗原的性質(zhì)有關(guān)。如要獲得大量的抗體,多采用大動物;如要是獲得直接標記診斷的抗體,則直接采用本動物;如要獲得間接的標記診斷用抗體,則必須用異源動物制備抗體;如果難以獲得的抗原,且抗體的需要量少,則可以采用純系小鼠制備;一般實驗室采用的抗體,多用兔和羊制備。免疫用的動物建議選擇適齡的健康雄性動物,雌性動物特別是妊娠動物用于制備免疫抗體則非常不合適,有時甚至不產(chǎn)生抗體。
抗體木瓜蛋白酶水解片段:木瓜蛋白酶水解Ig的部位是在鉸鏈區(qū)二硫鍵連接的兩條重鏈的近N端,可將Ig裂解為兩個完全相同的Fab段和一個Fc段。Fab段即抗原結(jié)合片段(fragment antigenbinding,F(xiàn)ab),由一條完整的輕鏈與重鏈的VH和CHl結(jié)構(gòu)域組成。一個Fab片段為單價,可與抗原結(jié)合但不產(chǎn)生凝集反應或沉淀反應;Fc段即可結(jié)晶片段(fragment crystallizable,F(xiàn)c),由Ig的CH2和CH3結(jié)構(gòu)域組成。Fc段無抗原結(jié)合活性,是Ig與效應分子或細胞相互作用的部位??贵w對于病毒傳染的控制尤為重要,如針對HIV的中和抗體研究具有重要意義。
多克隆抗體抗血清凍存:抗血清收獲后,加 1/萬硫柳汞或 1/萬的疊氮鈉防腐,或加入等量的中性甘油,分裝小瓶,置-20℃以下的低溫保存,數(shù)月至數(shù)年內(nèi)抗體效價無明顯變化。注意避免反復凍融。也可將抗血清冷凍干燥后保存。多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟:1、制備抗原。2、選擇實驗動物。3、動物免疫。4、試取血進行測試,看看是否成功免疫。5、如果成功免疫,殺死實驗動物,采集全部血清。6、純化出抗體。7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。具體操作與制備原理參見中國免疫學實驗網(wǎng)。抗體介導的細胞毒性可以直接殺傷傳染的細胞,起到去除病原體的作用。深圳PRR11多克隆抗體報價
抗體(antibody)是指機體由于抗原的刺激而產(chǎn)生的具有保護作用的蛋白質(zhì)。深圳PRR11抗體報價
多克隆抗體乳化作用:將抗原與佐劑混合的過程稱為乳化。乳化的方法很多,可采用研缽乳化;可直接在旋渦振蕩器上乳化;可用組織搗碎器乳化。少量時,特別是弗氏佐劑與抗原乳化時,常采用注射器乳化,用兩個注射器,一個吸入抗原液,一個吸入佐劑,兩注射器頭以膠管連接,注意一定扎緊,然后來回抽吸。當大量乳化時,可采用膠體磨進行。乳化好的標志是取一滴乳化劑滴入水中呈現(xiàn)球形而不分散。如出現(xiàn)平展擴散即為未乳化好。乳化過的物質(zhì)放置一段時間(在保存期內(nèi))出現(xiàn)油水分層也是未乳化好的表現(xiàn)。 深圳PRR11抗體報價